Ферментный порошок бромелайнапредставляет собой ферментную систему, гидролизующую белок, присутствующую в висячих растениях ананаса. Он имеет широкий спектр применения в пищевой и фармацевтической промышленности. Однако его низкая стабильность влияет на его применение, особенно в фармацевтической промышленности. В данной работе было изучено влияние условий влажности, температурного режима и радиации на протеазу ананаса с использованием сырья фармацевтической протеазы ананаса.
1 Материалы и методы
1.1 Бромелайновое сырье
Ферментный порошок бромелайна
1.2 Влияние влажности окружающей среды
Взвешенный и дозированный фермент помещали открыто в закрытый эксикатор (комнатная температура). Силикагель, насыщенный раствор NaQ и насыщенный раствор KNO помещали в эксикатор. Относительная влажность внутренней среды составляла 0,1 процента (75±1) процента 2,92 процента, и пробы отбирали через регулярные промежутки времени для определения активности фермента.
1.3 Влияние температуры
Взвешенные и порционные ферменты помещали при температуре 1-4 градуса, 29 градусов и 55 градусов соответственно, и периодически отбирали пробы для определения активности фермента.
1.4 Лучевое лечение
Взвешенные и дозированные ферменты герметично закрывали в пластиковых (ПВХ) центрифужных пробирках. Образцы облучались «излучением Кой» при комнатной температуре (~20 градусов). Мощность дозы составила 198 кГр/ч, поглощенные дозы — 4 кГр, 8 кГр и 12 кГр. Через 3 дня после облучения образцов определяли активность фермента и общее количество бактерий.
1.5 Метод определения
Бромелайн определяли методом FIP. Тирозин, гидролизованный из казеина, количественно определяли с помощью УФ-спектрофотометра и оценивали активность фермента. Казеин использовали в качестве субстрата и гидролизовали протеазой ананаса.
Общее количество бактерий определяли методом подсчета колоний на чашках.
2 результатов
2.1 Влияние условий влажности на хранение порошка фермента бромелайна
Результаты влияния условий влажности на хранение бромелайна показаны в таблице 1. Как видно из таблицы 1, активность фермента бромелайна была относительно стабильной в сухой среде. Скорость инактивации ферментов ускорялась с увеличением влажности окружающей среды. На поздней стадии эксперимента активность фермента значительно снижалась в условиях повышенной влажности. Лишь 40,4% и 14,4% активности фермента сохранялись после 105 и 315 дней хранения бромелайна соответственно. Тогда как сохранение активности ферментов составило 80,3% и 80,0% при относительной влажности (75+1)%.
Из прилагаемого рисунка можно увидеть, что это происходит в условиях сухой или низкой влажности. Инактивация протеазы ананаса происходила на ранних и поздних стадиях консервации и стабилизировалась. Это связано с тем, что влажность фермента на ранней стадии консервации превышает влажность окружающей среды. Более высокая влажность придает определенную гибкость структуре фермента. Конформация активного центра фермента склонна к изменению. Когда фермент достигает уровня сухой среды, влажность фермента снижается и активность фермента имеет тенденцию к стабилизации. Из рисунка также видно, что активность фермента снижается в условиях высокой влажности. Причиной этого является самогидролиз протеазы, а также высокая влажность, повышающая гибкость структуры фермента.
2.2 Влияние температурного режима на хранение порошка растительного фермента бромелайна
В таблице 2 представлены результаты исследования того, как температура влияет на хранение протеаз ананаса. Протеазы ананаса инактивировались как при высоких, так и при низких температурах, как показано в таблице 2, при этом высокие температуры были менее стабильными. Скорость их инактивации была выше на ранней стадии хранения и более умеренной на более поздней стадии. Степень сохранности фермента через 285 суток при 51 градусе (68,0 процентов) была выше, чем через 105 суток при высокой влажности (40,4 процента). При этом влияние температуры на фермент было гораздо меньше, чем влияние влажности. Влияние температуры на фермент было гораздо меньше, чем влияние влажности.
2.3 Влияние излучения 60Cor на активность протеаз ананаса и бактерицидный эффект
Результаты влияния 60Cor-излучения на активность протеазы ананаса и стерилизующий эффект представлены в таблице 3. Как видно из таблицы 3, потеря активности фермента составила 10,6%, 11,0% и 15,5% при поглощенная доза составила 4, 8 и 12 кГр соответственно. Их эффекты стерилизации были сопоставимы и составили 99,9 процентов, 100 процентов и 100 процентов соответственно. Чтобы свести к минимуму потерю активности фермента, можно выбрать дозу 4 или 8 кГр в зависимости от переноса источника фермента. В зависимости от количества фунгицида как стерилизация, так и уменьшение потери активности ферментов
3 Обсуждение
В этом эксперименте чувствительность фермента к влажности была выше, чем к температуре. Выживаемость фермента в условиях сушки силикагелем была лучше, чем при низкой температуре, а скорость инактивации фермента в условиях высокой влажности была значительно выше, чем при температуре 55 градусов. Среда с высокой влажностью увеличивала содержание влаги в ферменте и стала основным фактором инактивации фермента. Это тесно связано с самогидролизом протеазы ананаса. Поэтому при производстве следует обращать особое внимание на влажность среды хранения фермента и сухость самого фермента. Кроме того, происходит инактивация ферментов при использовании радиации для стерилизации протеазы ананаса. Как дополнительно улучшить стабильность сохранения и стерилизации бромелайна? Стабильность стерилизации протеазы ананаса. Необходимы дальнейшие исследования для выбора эффективных добавок, которые будут лучший способ улучшить стабильность консервации и стерилизации ферментного порошка бромелаина. Одним из средств будут добавки.
Компания Guanjie предоставляет порошок фермента бромелайна в больших объемах, используя метод испытаний GDU. Наш производственный процесс осуществляется в цехах, соответствующих стандарту CGMP, с использованием трех производственных линий на двух заводах и двух независимых лабораториях. По любым вопросам, касающимся нашей продукции, пожалуйста, свяжитесь с нами по адресу:info@gybiotech.com.
